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WestrnBlot的實驗方法原理是什麽？
更新時間：2018-07-26 點擊次數：1923次
WestrnBlot蛋白質印跡法（免疫印跡試驗），它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。
蛋白質免疫印跡（WestrnBlot）從蛋白質混合物中檢出目標蛋白質；（2）定量或定性確定細胞或組織中蛋白質的表達情況；（3）用於蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA、蛋白質-RNA相互作用後續分析。
實驗方法原理：
WestrnBlot是Western免疫印跡（WesternBlot）利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。
與Southern或Northern雜交方法類似，但WestrnBlot采用的是聚WestrnBlot物是蛋白質，“探針”是抗體，“顯色”用標記的二抗。
經過PAGE分離的蛋白質樣品，轉移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應，經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用於檢測蛋白水平的表達。
